PriCells:?人角質形成細胞的分離培養
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實驗材料:
1.?早產兒或死亡胎兒的皮膚,也可用手術取下的成體皮膚
2.?1000000U/L中性蛋白酶,0.25%胰蛋白酶
3.?MEM和HBSS混合液,添加20mmol/L?HEPES、200000IU/L青霉素和200mg/L鏈霉素和1.5g/L慶大霉素
4.?手術刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷
5.?離心管(15ml、50ml)
實驗方法:
1.?取厚1.5mm的皮片,用4℃MEM和HBSS混合液沖洗獲取的皮膚材料3次。將皮膚置于培養皿中,用鑷子和眼科剪仔細分離皮膚和皮下組織,去除脂肪和疏松結締組織。
2.?將皮膚展評,用手術刀切成2-3mm2的小片,放入中性蛋白酶消化液中,4℃下消化15-20h,或37℃下消化2-4h。動態結蠟測定儀
3.?用無菌針頭和眼科鑷子分離真皮與表皮。
4.?將分離出的表皮塊用0.25%胰蛋白酶,在37℃下振蕩消化10-20min后,加入含10%胎牛血清的培養基終止消化。
6.?調整細胞密度至1.5×105個/ml,植于塑料培養皿培養,也可與滋養層細胞共同培養
云標簽: 動態結蠟測定儀
文章標題:PriCells: 人角質形成細胞的分離(動態結蠟測定儀)
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